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高效液相色譜法同時測定食品中納他霉素和富馬酸二甲酯的含量

文檔作者：官詠儀1，邱志超擴，金夢1，宋陽1，張美金1，陳毓芳1，謝玉珊1 文檔來源： (1．廣東出入境檢驗檢疫局檢驗檢疫技術中心 2．廣州質量監督檢測研究院		點擊數：	更新時間： 2025年06月28日
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第8卷第6期食品安全質量檢測學報Vbl．8 No．6
2017年6月Joumal ofFood Safety and Quality Jun．，2017
高效液相色譜法同時測定食品中納他霉素和
富馬酸二甲酯的含量
官詠儀1，邱志超擴，金夢1，宋陽1，張美金1，陳毓芳1，謝玉珊1
(1．廣東出入境檢驗檢疫局檢驗檢疫技術中心，廣州510623；2．廣州質量監督檢測研究院，廣州511447)
摘要：目的建立高效液相色譜法同時測定食品中納他霉素、富馬酸二甲酯的分析方法。方法樣品用甲
醇溶解提取、超純水定容，Agilent Tc．c18柱色譜分離，采用高效液相色譜-光電二極管陣列檢測器進行檢測，
并以峰面積外標法定量。結果在4種基質、4個添加水平下，納他霉素的平均回收率在88．1％～97．7％之間，相
對標準偏差為2．47％～5．72％，檢出限為0．10 mg／kg；富馬酸二甲酯的平均回收率在84．5％～104％之間，相對標
準偏差為1．21％～5．28％，檢出限為0．05 mg／蠔。結論該方法具有操作簡便、快速、準確的特點，適用于食品
中納他霉素、富馬酸二甲酯的含量分析。
關鍵詞：高效液相色譜法；納他霉素；富馬酸二甲酯
Simultaneous determination of natamycin and dimethyl fumarate in foods by
high perfbrmance liquid chromatography
GUAN Yong—Yil，QIU Zhi—Chao擴，JIN Men91，SoNG Yan91，ZHANG Mei—Jinl，
CHEN Y-u—Fan91，XIE Yru—Shanl
(1．^％￡p已cffo玎口咒d Q“口，‘以珂ffn已Z吝c^nD正9呈∥CP胛據r，G“Ⅱ玎。寶臼。玎g．￡抽f，)，一．￡強豇砌置PecfiD胛口玎d Q“口，。口玎fi胛P曰“，它口甜，
Gzf口以罟z五D“5 1 0623，(瑰in以；2．G“以胛gz矗o“Q“a，f鈔-S缸pe，V括fo玎and 7匆sffng砌sf打“fe，G“口聆gz矗D“5 1 1447，(璃i玎n)
ABSTRACT：objective Tb establish a method for simultaneous detemination ofnatamycin and dimethyl fumarate
(DMF)in foods by high perfomance liquid chromatography(HPLC)．Methods S啪ples were extracted by
methanol and water，separated by Agilent TC—C18 column，detected by HPLC with photo—diode array detector(PDA)
and quantified by the extemal standard method．Results At 4 dif佗rent spiked 1evels in 4 kinds of food，the aVerage
recoveries of natamycin were between 88．1％～97．7％，with the RSD of 2．47％～5．72％．The aVemge recoVeries of
dimethyl fIlmarate were between 84．5％～104％，with the RSD of 1．21％～5．28％．Detection 1imits of nat砌ycin and
DMF were 0．1 0 mg／埏and O．05 m∥蠔，respectively．conclusion This method is simple，fast and accurate，which
can be applied to the analysis of the contem of natamycin and DMF in foods．
KEY WoItDS：hi曲perfbmance liquid cllromatogr叩hy；natamycin；dimethyl如m缸ate
1 引言
納他霉素(natamycin)，也稱游鏈霉素、匹馬菌素或海
松素，是一種重要的多烯類抗菌素，能夠有效抑制酵母菌
等真菌的生長，且其難溶于水和油脂，難以被人體消化、
吸收，大部分攝入的納他霉素會隨糞便排出，對人體造成
t通訊作者：邱志超，碩士，質量工程師，主要研究方向為食品質量與安全檢測。E-mail：392479231@qq．com
+correspoⅡding author：QIu zhi—chao，Master，QuaI塒Engineer，Guangzhou Quality supeⅣision and Testing Institute，No．1—2，zhujiang Road，
Chao Tian In“strial zone，Shilou Town，Pan”District，Guangzhou 511447，China．E—mail：39247923l@qq．com
萬方數據
第6期官詠儀，等：高效液相色譜法同時測定食品中納他霉素和富馬酸二甲酯的含量2247
的毒性傷害極低，因而被批準用于食品的防腐¨21。GB
2760一2014《食品添加劑使用標準》中對納他霉素在食品中
的最大使用量及表面使用殘留量作出了規定，其中表面使
用殘留量不得大于10 mg／1(擴1。富馬酸二甲酯(dimethyl
fumarate，DMF)化學名為反丁烯二酸二甲酯，別名延胡索
酸二甲酯，能夠有效抑制多種霉菌、酵母菌和細菌的生長，
進入人體后能分解成人體新陳代謝的正常成分“富馬酸”，
曾經被認為是一種低毒、高效、有前途的防腐劑而被廣泛
應用于食品中【4，5】。但近年來，歐盟通報了多起消費者因接
觸富馬酸二甲酯而受傷的案例，有研究表明富馬酸二甲酯
易水解成甲醇，會對人體腸道、內臟造成腐蝕性損害，如
長期食用對肝、腎有較大的副作用【5]。2009年2月，全國
打擊違法添加非食用物質和濫用食品添加劑專項整治領導
小組發布的《食品中可能違法添加的非食用物質名單(第二
批)》(食品整治辦(2009]5號)【6]文件中，明確規定了富馬
酸二甲酯屬于食品中可能違法添加的非食用物質。
目前，測定納他霉素的常見方法有高效液相色譜法
[7】、液相色譜一質譜聯用法[8]、生物檢測法【9】和加壓毛細管
電色譜[1 o】等。富馬酸二甲酯常見的測定方法有高效液相色
譜法[111、液相色譜．質譜聯用法‘51、氣相色譜法[12】、氣相色
譜．質譜聯用法[1 3]和薄層法[】4]等。最常用的為液相色譜法
[1 5’1”，但流動相中多含緩沖鹽或偏酸，不利于色譜柱的長
久使用維護，針對多類食品同時開展納他霉素和富馬酸二
甲酯含量檢測的文章報道也鮮少見到。本研究采用高效液
相色譜法同時測定食品中的納他霉素和富馬酸二甲酯，具
有高效、快速、準確、廣泛、高通量的優點，為愈發繁重
的食品安全檢測工作提供了便利。
2材料與方法
2．1儀器與試劑
waters alliance e2695高效液相色譜儀(配備光電二極
管陣列檢測器，美國waters公司)；BT 124s電子天平(德
國sanorius公司)；sw 30H超聲波清洗機(瑞士s0N0
swIss公司)；Multi ReaX渦旋振蕩器(德國Heid01ph公司)；
4K15高速離心機(德國Sigma公司)；微孔有機相濾膜(孔徑
為0．22¨m)。
甲醇(色譜純，美國Thenno Fisher scientific公司)；超
純水(由Mill．Q純水器系統制得)；納他霉素(純度91．1％，
美國藥典)；富馬酸二甲酯(純度99．5％，德國
Dr．Ehrenstorfer公司1。
牛奶、糕點、熟肉、飲料購于當地超市。
2．2實驗方法
2．2．1標準溶液的配制
分別稱取約25 mg納他霉素、富馬酸二甲酯標準物質，
用甲醇：水(1：1，曠功溶解定容至25 mL，配制成1000 m∥L
的標準儲備液，于一20℃下保存。臨用前分別移取適量納他
霉素、富馬酸二甲酯的標準貯備液至同一容量瓶中，用甲
醇：水(1：l，壚功定容稀釋配制成100 mg／L的混合標準溶液，
然后用甲醇：水(1：1，礦功逐級稀釋得到質量濃度為0．05、
0．10、0．20、O．50、1．00、2．00、5．00、10．00、20．00 m∥L
的系列標準溶液。
2．2．2樣品前處理
稱取5．00 g樣品于50 mL具塞塑料離心管中，加入30
mL甲醇，超聲10 min、渦旋15 min溶解提取。用超純水
定容至50 mL，混勻后放人冰箱冷凍30 min左右，10000
r／min高速低溫離心5 min，經0．22 um有機相濾膜過濾后，
供液相色譜上機分析。
2．2_3 色譜條件
色譜柱：A皇ilent Tc·c18色譜柱(250 mm×4．6 mmj 5
肚m)；流動相為甲醇：水(65：35，礦"；流速為0．8 mL／min；
柱溫為25℃；進樣量為20此；波長為218砌。
2．3數據處理和統計方法
采用Empower3軟件進行數據處理，輸出線性回歸方
程和含量結果。4種基質分別進行空白實驗和4個添加濃
度水平的加標回收率實驗，其中空白實驗采用2個平行重
復實驗后取平均值。加標實驗每個添加濃度進行6平行，
各自扣除空白后計算回收率實驗，最終得出平均回收率和
相對標準偏差。
3結果與分析
3．1分析條件的優化
3．1．1流動相的選擇
參考各類標準方法和文獻，一般以乙酸鈉一甲醇、乙酸
銨．甲醇、甲醇一水一乙酸為流動相，這些流動相一般存在緩
沖鹽比例較高、pH值偏酸的特點，不利于色譜柱的長久使
用與維護。本研究選用常用的甲醇：水(65：35，"功作為流動
相。如圖1所示，在此流動相下，納他霉素和富馬酸二甲
酯標準品峰形對稱、分離度高。圖2為4種不同基質的樣
品加標色譜圖，基質本底皆不含納他霉素和富馬酸二甲酯，
加標濃度為50 mg／L，其中牛奶、糕點、飲料樣品色譜圖，
目標峰周圍無干擾峰，分離度高；熟肉樣品因樣品基質復
雜，富馬酸二甲酯左側有一小干擾峰，因而回收率比其他
3種基質略低，但仍達到80％，滿足檢測要求。
3．1．2檢測波長的選擇
取20皿質量濃度為20 mg／L的納他霉素和富馬酸二
甲酯混合標準溶液，在波長200～310 nm范圍內掃描。結果
顯示(見圖3)，富馬酸二甲酯和納他霉素的最大吸收分別
出現在210 nm和303 nm處，當納他霉素出現最大吸收時
富馬酸二甲酯已趨向于無吸收。在215～225 nm范圍內，富
馬酸二甲酯一直保持高響應，納他霉素的響應值也能保證
在105以上且變化不大。同時，為了避免在分析檢測過程
萬方數據
2248 食品安全質量檢測學報第8卷
中儀器可能出現的波動導致保留時間變化，所以設置方法
時不考慮波長變化時間的設定，最終選取218 11IIl作為本
研究的分析波長。
3．1．3提取溶液的選擇
駱健美等[¨1研究納他霉素在不同溶劑中的溶解度，
發現納他霉素在甲醇中的溶解度最好。富馬酸二甲酯在食
品中的檢測農業標準中用氨水：甲醇(1：20，矽功提取后再用
鹽酸調節pH值[11】，但劉義等[161在實驗過程中發現富馬酸
二甲酯在堿性條件下會發生分解，之后通過酸調節pH值
也不可逆，且富馬酸二甲酯在甲醇中易溶，因此選用甲醇
作為提取溶液。因為流動相為甲醇：水(65：35，曠功，所以經
甲醇提取后用超純水進行定容，使上機溶劑濃度比例接近
流動相。引6
3．2方法學驗證o．10
3．2．1 標準曲線及檢出限
在O．1～20．0 mg／L質量濃度范圍內，線性良好，得到
納他霉素標準曲線回歸方程為p3．77×10％1．35×103，富
馬酸二甲酯標準曲線回歸方程為y_1．27×10’尉7，74×102，
線性相關系數，均大于0．999。分別以糕點、牛奶、熟肉、
飲料為基質，逐級稀釋混合標準溶液上機分析，通過3倍
信噪比，得出納他霉素和富馬酸二甲酯的檢出限分別為
焉|——業—上o‘00匕==二二二=：==蕉2====]圭三【=
l：富馬酸二甲酯(dimethyl fumarate)；2：納他霉素(natarnycin)
圖1富馬酸二甲酯、納他霉素標準(20 mg／L)色譜圖
Fig．1 Chromatogram of dimethyl fumamte and natamycin standard
(20 mg／L)
1：富馬酸二甲酯(dimethyl fumarate)；2：納他霉素(natamycin)
圖2 富馬酸二甲酯、納他霉素樣品加標(50 m∥L)色譜圖
Fig．2 chmmatograms of dimethyl mrnamte and natamycin spiked samples(50 m∥L)
萬方數據
第6期官詠儀，等：高效液相色譜法同時測定食品中納他霉素和富馬酸二甲酯的含量2249
3．5×106
2．5×106
2．O×106
l 5×106
1．O×106
5．O×105
200 205 2lO 215 220 225 230 235 240 245 250 255 260 265 270 275 280 285 290 295 300 305 3l
圖3不同檢測波長的響應值
Fig．3 Response signal values of difkrent detected waVelengms
表1 4種基質中納他霉素和富馬酸二甲酯的加標回收率和相對
標準偏差0=6)
Thble 1 Results of recoveries and relative standard deviations of
natamycin and dimethyI fumarate in 4 I【inds of food(櫛=6)
4結論
本研究選用4種具有代表性的食品基質，分別添加不
同濃度水平的標準物質，經甲醇超聲提取、超純水定容后，
一波長(nm)
O
在優化的高效液相色譜條件下進行上機分析，納他霉素和
富馬酸二甲酯皆有良好的線性、回收率和相對標準偏差。
本方法具有靈敏度高、穩定性好、快速簡便的優點，能夠
廣泛應用于各類食品中高通量同時檢測納他霉素和富馬酸
二甲酯。
參考文獻
?岳吳博，岳喜慶，李靖，等．納他霉素(natamycin)的特性、應用及生產
和研究狀況[J】食品科技，2007，3(45)：162—166．
Yue HB，Yue XQ，Li J，甜口，．The ch鋤cteristics，application，production
and research stams of natamycin[J]．Food sci 1bclmol，2007，3(45)：
162—166．
[2】閻永貞，周緒霞，李衛芬，等．納他霉素抑菌機理及其在食品中的應用
[J]．食品工業科技，2叭0，4(79)：365—367，373．
Yan YZ，Zhou XX，Li WF，鰣nf．Antimicrobial mech姐ism and the
application 0f natamycin in food[J]sci Tecllllol Food Ind，2010，4(79)：
365—367．373．
[3]GB 2760．2014食品安全國家標準食品添加劑使用標準[s]．
GB 2760．2014 National food safbty staIldard for uses of food additives
[S]
f4]韓云海，唐政，韓萍．新型食品防腐劑富馬酸二甲酯的合成[J]化學
工程與設備，2008，(7)：27—28
Han YH，Tang Z，Han P Syllthesis of new food preseⅣatiVe named
dimethyl fumarate【J]chem Eng Equip，2008，(7)：27—28．
[5]唐麗娜，寧煥炎，曾憲遠，等．超高效液相色譜一串聯質譜法測定糕點
中富馬酸二甲酯[J】安徽農業科學，2014，42(21)：7178-7179，7200
Tang LN，Ning HY，zeng xY，鮒口f DeterIIlination of dimethyl m眥rate in
cake by ultra hi曲perf0姍a11ce liquid chromatogr印hy-tandem mass[J]J
A11hui Agric sci，2014，42(21)：7178—7179，7200．
[6]食品中可能違法添加的非食用物質名單(第二批)[z]
List ofillegal addnives maybe add in foods(second batch)[z]．
[7】張慧，吳穎，朱蕾，等超高效液相色譜法檢測飲料中納他霉素的含量
[J]食品工業科技，2012，(08)：86—87，91．
Zhang H，Wu Y Zhu L，“df．Detemination of natamycin in Vanous
萬方數據
2250 食品安全質量檢測學報第8卷
driTlks by ultra perf0加ance liquid chmmatography[J]sci Techn01
F00d Ind，2012，(08)：86—87，91．
[8]李嬡媛，王偉，關樹文，等高效液相色譜-串聯質譜法測定酸奶中納
他霉素的含量[J]中國衛生檢驗志，2010，20(4)：76l一762．
“YY’Wallg w，Guan S W，“n，DeteⅡnination of natanlycin in yogb叭
using liquid chromatography-mass spec仃ome‘ry[J]．chin J Health Lab
Technol，2010，20(4)：761—762
[9]喬春明，劉坤，葛菁萍，等發酵液中納他霉素的生物檢測法[J】食品
科學，2009，(7)：159—161．
Qiao cM，Liu K，Ge QP，甜口， Bioassay method of natamycin in
fementanon broth【J]Food sci，2009，(7)：159一161．
[10】郭啟雷，趙麗，史海良，等．加壓毛細管電色譜測定食品中納他霉素的
檢測方法研究[J]食品工業，2014，(12)：276_279．
Guo QL，zhao L，shi HL，甜口f．Determination of natamycin in foods by
press謝zed c印i11ary electro—chromatography[J]F00d Illd，2014，(12)：
276—279．
[1 1]NY／T 1723-2009食品中富馬酸二甲酯的測定高效液相色譜法[s]
NY廠r 1723-2009 Detem=lination of dimetIlyl血marate in food—Hi曲
perfomallce liquid c11romatography method[S]．
[12]徐麗紅，王建清，丁蓓茹，等Gc法檢測三類食品中富馬酸二甲酯的
含量[J]浙江農業學報，2011，(4)：807—811．
xu LH，waIlg JQ，Ding BR，“口?Detemination of dimethyl fumarate in
t11rce呻es of foodby gas chromatography【J]Acta A鰣c zhejiangensis，
2011，(4)：807—811
[13]梅雯芳，唐明，王佳杰，等．氣質聯用測定糕點中富馬酸二甲酯[J]食
品工業，2012，(09)：151—153
Mei wF，Tang M，Wang JJ，“Ⅱ，smdy on dirnethyl mmarate ofthe pas仃y
by GC／Gc-MS chromatogr印hy[J]．Food Ind，2叭2，(09)：151—153．
[14]張楊，陳偉強．薄層法檢測富馬酸二甲酯方法探討[J]中國衛生檢驗
雜志，2001，(6)：722
zhang Y chen wQ study on detecteing of dimethyl n瑚arate by tl】m
layer chmmatography[J]Chin Health Lab Tcchnol，2001，(6)：722
[15]駱健美，金志華，岑沛霖，等．納他霉素在不同溶劑中溶解度的測定與
關聯[J]高校化學工程學報，2008，22(5)：733—738．
Luo JM，Jin ZH，Cen PL，“口Z MeasWement and correlation of the
solubilities of natamycin in difrerent solvents[J】．J chem Eng chill univ，
2008，22(5)：733138．
[16]劉義，朱顯琴，邱宏，等．高效液相色譜法同時測定食品中的糖精鈉、
苯甲酸、山梨酸、富馬酸二甲酯和脫氫乙酸鈉[J]中國衛生檢驗雜志，
2009，19(3)：582—583．
Liu Y，zhu xQ，Qiu H，甜以simultaneously detemination of saccha山
sodium， benzoic acid， sorbic acid， dimethyl mmarate and
dehydrogenation sodium acetate in foods by hi曲perfb肌ance iiquid
chromatography[J]chin J Health Lab T色chnol，2009，19(3)：582—583．
[17]GB／T 21915-2008食品中納他霉素的測定液相色譜法[s]
GB／T 21915-2008 Dete加ination of nat枷ycin in food—Liquid
chromatography[S]
(責任編輯：楊翠娜)
日
官詠儀，食品檢驗工程師，主要研究
方向為食品營養成分和添加劑檢測。
E—mail：stupid625@qq．com
邱志超，碩士，質量工程師，主要研
究方向為食品質量與安全檢測。
E-ma訂：39247923 l@qq．com

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